膀胱癌原位建模

材料准备

硝酸银溶液
- AgNO₃ 避光保存，配制浓度为 0.3 M，每只小鼠 4 μl，溶于 ddH₂O 中
- AgNO₃ 分子量为 169.87，如果制备 1 ml，需要0.3×169.87/1000 = 50.961 mg。一般是先称取硝酸银，再计算要多少溶剂。硝酸银质量为 x mg 时溶液体积 = x/(0.3×169.87) (ml)

其它材料
- 阿佛丁
- 液态石蜡
- 两把 200 μl 移液枪
- 一把 20 μl 移液枪
- 至少 3 根 BD 软针
- 至少 2 个 200 μl 枪头（枪头尖端剪掉至能伸入 BD 软针后端）
- 计时器
- 纸
软针与枪头的搭配（标记区分）
- 1 号 BD 软针（插入尿道排尿）
- 2 号 BD 软针（硝酸银溶液）+ 1 号枪头（PBS）
- 3 号 BD 软针 + 2 号枪头（细胞悬液）

腹腔注射麻醉小鼠
液态石蜡涂抹尿道口和 1 号软针头润滑
1 号软针插入尿道（小鼠尿道分两段，呈 L 形），按压膀胱排空尿液
200 μl 移液枪用 1 号枪吸取 100 μl PBS 备用（每做完一只老鼠，下一只老鼠开始前或者等待麻醉期间，补充 PBS）
20 μl 移液枪接上 2 号软针吸取 4 μl AgNO₃。注意针头不要伸入液面太多，吸取完擦去针外壁液体，避免尿道腐蚀后成瘤。
2 号针插入尿道，抵住膀胱壁后针头稍微后退（不后退液体打不出去），打入 AgNO₃，计时 15 s。
软针留在尿道口，移去 20 μl 移液枪，接上准备好的带 PBS 的 200 μl 移液枪，15 s 一到立刻打入膀胱，反复吹打冲洗 4 ~ 5 次，溶液会变浑浊。最后一次吸取要按压膀胱，尽量移去所有膀胱内溶液。吹打时适当按压膀胱，软管可适当后移。
弹散肿瘤细胞悬液，200 μl 移液枪接上 3 号针 + 枪头吸取 50 μl，打入小鼠膀胱，移液枪只打第一段，不打第二段（主要注意不要让末端气泡离开针头），打完不松手，保持 15 s。
垫高小鼠臀部，静置。完成实验。